SKRIPSI Jurusan Biologi - Fakultas MIPA UM, 2015

Ukuran Huruf:  Kecil  Sedang  Besar

Aktivitas Fosforilasi ATP Pada Protein 64 dan 33 kDa Membran Spermatozoa Sapi Aberdeen Angus Sebagai Parameter Kualitas Sperma.

RIZAL KURNIAWAN SAKTI

Abstrak


ABSTRAK

 

Sakti, Rizal Kurniawan. 2015. Aktivitas Fosforilasi ATP Pada Protein 64 dan 33 kDa Membran Spermatozoa Sapi Aberdeen Angus Sebagai Parameter Kualitas Sperma. Skripsi. Jurusan Biologi, Fakultas matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Malang. Pembimbing : (I) Dr. Umie Lestari, M.Si, (II) Dra. Nursasi Handayani, M.Si.

 

Kata Kunci: Analisis Protein, Protein Transmembran Spermatozoa, Aktivitas Fosforilasi, Parameter kualitas sperma.

 

Rendahnya Inseminasi Buatan (IB) dapat dijadikan evaluasi dalam pengujian kualitas sperma. Biasanya pengujian spermatozoa sebelum IB hanyalah seputar dengan pengujian makroskopik dan mikroskopik. Selain itu, juga dapat melalui pengujian secara molekular yaitu dengan melihat prediksi kadar ATP melalui isolasi protein membran spermatozoa sapi yang digunakan dalam proses IB. Sapi yang terkait dalam penelitian ini adalah sapi Aberdeen angus. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui aktivitas fosforilasi ATP pada protein membran spermatozoa sapi aberdeen angus sebagai parameter kualitas sperma sapi.

Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif eksploratif dengan observasi laboratoris yang dilakukan dalam bulan November-Desember 2015. Analisis protein menggunakan crude protein hasil isolasi protein transmembran spermatozoa sapi Aberdeen angus yang kemudian dilakukan analisis dengan menggunakan metode elektroforesis SDS-PAGE yang telah memunculkan pita protein spesifik dengan berat molekul 64 kDa sebagai calcium binding protein dan 33 kDa sebagai protein tirosin fosforilasi. Pita tersebut kemudian dipotong dan dilakukan analisis dengan metode elektroelusi. Protein hasil elektroelusi dilakukan perhitungan untuk mencari ATP yang bereaksi dan unit aktivitas fosforilasi. Didapatkan hasil, protein pada berat molekul 64 kDa telah memfosforilasi ATP sebesar 41 ppm dengan unit aktivitas 119,013062x103 µmol/ml/menit dan protein dengan berat molekul 33 kDa telah memfosforilasi ATP sebesar 27 ppm dengan unit aktivitas 78,374456x103µmol/ml/menit. Besarnya jumlah ATP yang difosforilasi mengindikasi bertambahnya unit aktivitas fosoforilasi serta bertambahnya kecepatan protein dalam memfosforilasi protein.

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa, aktivitas fosforilasi protein membran spesifik dengan berat molekul yaitu 64 kDa lebih besar daripada protein membran pada berat molekul 33 kDa yang dilihat dari banyaknya ATP yang bereaksi dan unit aktivitas protein dalam memfosforilasi gugus fosfat yang terdapat pada molekul ATP. Besarnya nilai ATP yang bereaksi sebanding dengan besarnya jumlah unit aktivitas fosforilasi dan kecepatan fosforilasi setiap protein.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ABSTRACT

 

Sakti, Rizal Kurniawan. 2015. Protein Phosphorylation Activity of ATP At 64 And 33 kDafrom Aberdeen Angus Bovine Sperm Membrane For Parameter Testing Sperm Quality. Undergraduate-Thesis. Deparment of Biology, Mathematic and Natural Science Faculty, State University of Malang. Lecturer: (I) Dr. Umie Lestari, M.Si, (II) Dra. Nursasi Handayani, M.Si.

 

Key word: Protein analyze, Spermatozoa Transmembran Protein Phosphorylation activity, Parameter sperm quality.

 

LowArtificial Insemination (AI) can be used as an evaluation in testing the quality of sperm. Usuallytesting is just around the spermatozoa before AI with macroscopic and microscopic examination. in addition, it can also through molecular testing is to look at the predictions of ATP levels through spermatozoa membrane protein isolation cattle used in the AI. Bovine that are involved in this research are Aberdeen Angus bovinethe purpose of this study was to determine the activity of ATP in the membrane protein phosphorylation spermatozoa Aberdeen angus bovine as parameters of sperm quality testing bovines.

This study is a descriptive exploratory study with laboratory observations were conducted in November-December 2015. Analysis of the protein using crude protein transmembrane protein isolated spermatozoa Aberdeen angus bovine which is then analyzed using SDS-PAGE electrophoresis method that has led to specific protein bands with heavy 64 kDa molecule as a calcium binding protein and 33 kDa as protein tyrosine phosphorylation. The ribbon is then cut and performed analysis, with methods of electroelution. Protein electroelution calculation result to find that react ATP and phosphorylation activity unit. The results obtained, the protein molecular weight 64 kDawas phosphorylate ATP at 41 ppm with 119,013062x103 activity unit mol / ml / min and a protein with a molecular weight of 33 kDa was phosphorylate ATP by 27 ppm with 78,374456x103 activity unit mol / ml / min. The large amount of ATP that is phosphorylated indicates increasing unit phophorylation activity and increased speed phosphorylate proteins in protein.

Studywe can conclude that, the activity of protein phosphorylation specific membrane with a molecular weight is 64 kDa larger than the membrane proteins on a molecular weight of 33 kDa as seen from the number of ATP reacting and units of protein activity in phosphorylate phosphate groups contained in the molecules of ATP. The value of ATP reaction in proportion to the number of units phosphorylation activity and speed of each protein phosphorylation.